過敏源試劑采用親和素-生物素化過敏原抗原預(yù)包被板ELISA原理，檢測人血清/血漿中存在的針對特異性過敏原IgE抗體，配以酶標(biāo)記抗人IgE單克隆抗體作為標(biāo)記物。加入底物TMB顯色后終止反應(yīng)，在450nm波長測各孔O.D值，O.D值的大小與待檢抗體含量成正比。
 

　　過敏源試劑主要組成成分：
 

　　檢測板：包被有過敏原和生物素標(biāo)記的牛血清白蛋白(陽性質(zhì)控，位于每條試劑條的較上端)的硝酸纖維素膜，置于塑料反應(yīng)槽中；
 

　　洗脫液：(TRIS/NaCl，包含NaN3)，可稀釋的清洗液;標(biāo)記有生物素的抗人IgE抗體(多抗)，含NaN3;酶標(biāo)鏈霉親和素，連接有堿性磷酸酯酶的鏈霉親和素(含C4H5NOS和C4H6BrNO4);底物，BCIP/NBT(5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸鹽/氯化硝基四氮唑藍(lán))。
 

　　過敏源試劑的試驗操作：
 

　　試劑盒中的所有成分必須是同一批。過期時請勿使用。使用前須平衡至18~30C.
 

　　1.去掉尾端的白色封頭和頂端的紅蓋，讓反應(yīng)管內(nèi)的緩沖液排出。用紗布擦試細(xì)頭。
 

　　2.將注射器接在反應(yīng)管的頂端，將標(biāo)本由細(xì)頭抽到注射器接頭
 

　　3.將反應(yīng)管平放，在室溫下(18-30C)反應(yīng)100分鐘。
 

　　4.將標(biāo)本從反應(yīng)管排出，抽出注射器的推桿，由注射器針簡向反應(yīng)管內(nèi)注入1毫升(4項組合產(chǎn)品為0.8m)清洗液，將注射器的推桿插入并推到底，用紗布擦試細(xì)頭。
 

　　5.將綠色的結(jié)合液由細(xì)頭抽到注射器的接頭處。
 

　　6.將反應(yīng)管平放,在室溫下(18~30C)反應(yīng)100分鐘或16小時。
 

　　7.將結(jié)合液由反應(yīng)管排出，抽出注射器的推桿。加五濉清洗液到注射器針簡中，讓它流下。再在注射器針簡內(nèi)注入1毫升(4項組合產(chǎn)晶為0.8m1)清洗液，讓它流過反應(yīng)管。將注射器的推桿插入并推到底，用紗布擦試細(xì)頭。
 

　　8.在塑料燒杯中注入少量(約2毫升，4項組合產(chǎn)品為1.5ml)清洗液。通過反應(yīng)管將清洗液抽到注射器中。抽出注射器的推桿，讓清洗液流出。9.在注射器針簡內(nèi)注入1毫升(4項組合產(chǎn)F品為0.8m)清洗液，讓它自然流下。重復(fù)一次。將注射器的推桿插入并推到底，用紗布擦試細(xì)頭。
 

　　10.將黃色的底物/指示劑通過反應(yīng)管抽到注射器中。
 

　　11.平放反應(yīng)管，強(qiáng)陽性標(biāo)本在5分鐘內(nèi)可觀察由黃到紫的顏色變化，弱陽性標(biāo)本在90分鐘內(nèi)觀察顏色變化。